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關(guān)于血清滅活的幾個(gè)問題!

更新時(shí)間:2021-05-17    點(diǎn)擊次數(shù):5270

  關(guān)于血清滅活的幾個(gè)問題!

  1、問:加到培養(yǎng)基中的血清必須滅活嗎?

  答:不是必須的,看做什么實(shí)驗(yàn)了。

  2、問:胎牛血清滅活是56℃30分鐘嗎?

  答:如果用于培養(yǎng)大多數(shù)的腫瘤細(xì)胞,血清般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長因子。但是如果用于培養(yǎng)些表面具有補(bǔ)體受體的細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞,血清是需要滅活,般是56℃,30min。

  3、問:我要做滋養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng),胎牛血清要滅活嗎?

  答:進(jìn)口的般都已滅活,國產(chǎn)的不定,還是滅活下再用較安全。

  4、問:我用病毒上清轉(zhuǎn)染細(xì)胞,培養(yǎng)用的血清需要滅活嗎?因?yàn)檠逯锌赡苡行┭a(bǔ)體和抗體,是不是會(huì)影響轉(zhuǎn)染?我想未滅活的血清中含些抗體補(bǔ)體可能會(huì)和病毒相結(jié)合,影響轉(zhuǎn)染,正確嗎?細(xì)胞是單核細(xì)胞白血病細(xì)胞,病毒是病毒包裝細(xì)胞PT67收集的病毒上清。為什么要用無血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時(shí),目的是什么?

  答:血清定要滅活,可以先用無血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時(shí)以后再加血清。避免雜蛋白對(duì)病毒和宿主結(jié)合過程的干擾,般是2-6小時(shí),根據(jù)細(xì)胞的狀態(tài)決定。血清不定需要滅活,滅活的目的是將血清中的補(bǔ)體滅活!這要根據(jù)實(shí)際情況而定,如果沒有把握那就滅活吧,也不麻煩56度半個(gè)小時(shí)。

  5、問:(1)我買的是天津本生的新生牛血清,要滅活嗎?有些說法是需要,有些說直接解凍后就可以加入到培養(yǎng)基中;我配制胰蛋白酶液,用的是D-PBS,有關(guān)系嗎?

  答:關(guān)于血清的熱滅活,是很多人感興趣也存在定爭(zhēng)議的話題。大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室將血清的熱滅活還是作為常規(guī)來執(zhí)行,因?yàn)橛袃蓚€(gè)作用,第yi是滅活補(bǔ)體,第二是滅活血清中可能存在的支原體。但是實(shí)驗(yàn)者并沒有考慮熱處理對(duì)血清中的生長因子、氨基酸等成分帶來的負(fù)面影響

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